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講座回放:NGS二代測序質控解決方案
來源: Admin    更新時間: 2017-09-29    瀏覽: 1056 人次

        對二代測序來說,裝載的樣本質量(核酸的質量和數量)非常重要。測序結果的成敗往往取決于你是否知道你的樣本有多少DNA(通常為ng級)。在NGS的工作流程中,從樣品中抽提核酸到開始進行文庫構建;文庫構建后期——構建條碼庫用于擴增;在裝載樣品到測序系統上測序前的所構建文庫的定量的幾個關鍵點上,對擴增后的文庫中的分子進行精確的定量檢測,對于確保片段的質量和高效的獲得數據是非常重要的。低估擴增文庫中的分子數量,會導致混雜的信號以及難以解析的數據;相反地,高估分子的數量會降低結合模板的珠子或者DNA簇的產量,并且沒有充分利用測序能力。因此準確對樣本定量和評價質量決定了測序工作能否正常進行。

        核酸的定量通常有兩種常用方法:紫外分光光度法和熒光法。這兩種方法在檢測原理、檢測靈敏度和操作方法上的大不相同,在實際運用中需要根據具體的實驗要求選擇最佳的方法來進行核酸定量。

        此次講座著重介紹幾種基于多功能酶標儀系統的紫外分光光度法和熒光法核酸定量方案,為二代測序的樣品前處理中的高通量核酸/文庫定量提供更好的解決方案。






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